骨筋丸胶囊质量控制研究进度

骨筋丸胶囊系由白芍、延胡索、马钱子、三七等14 味药物组成的复方制剂，具有活血化瘀、舒筋通络、祛风止痛之功效。市场调研表明：该品种上市后得到广大患者的认可，目前我国共有39 家制药企业获得骨筋丸胶囊生产的批准文号。该制剂质量标准收载于《卫生部药品标准中药成方制剂》第十三册，根据现行《药品注册管理办法》及相关技术指导原则要求对骨筋丸胶囊进行提高质量标准的研究工作。笔者就该制剂的质量研究做一简要概括：

1.1 骨筋丸胶囊生产工艺

骨筋丸胶囊制备工艺为将延胡索、马钱子、三七、血竭粉碎成细粉，过筛，混匀;郁金、木香、独活、桂枝用一定浓度乙醇提取，药渣加入其余白芍等四味加水煎煮过滤并与乙醇提取液合并，浓缩至相对密度为1.15的清膏，喷雾干燥成干膏粉，加入乳香、没药等药粉及辅料适量，混匀制粒，干燥，装入胶囊，制成骨筋丸胶囊。

2.1 骨筋丸胶囊鉴别

鉴于该品种所含药味较多，工艺复杂，按照有关中药复方制剂的鉴别选择原则，需对制剂中三分之一以上药材进行鉴别的说明。笔者总结了近年来文献报道有关该制剂中鉴别的药材及方法，主要如下：

2.2.1 显微鉴别

根据骨筋丸胶囊制备工艺，其中六味药材为生粉入药，可以考虑进行显微鉴别。 目前文献报道对该制剂中血竭进行了粉末显微鉴别的质量控制。

2.2.2 薄层色谱鉴别

薄层色谱技术在中药制剂鉴别中应用受到推广。骨筋丸胶囊中多味药材进行了有关薄层色谱的鉴别。冯素香[4] 等以血竭对照药材，展开剂三氯甲烷- 甲醇 建立了该制剂中血竭的薄层鉴别方法。冯素香 等以三七对照药材为标准，对该制剂中三七进行了薄层定性鉴别;邢志霞进一步改进了方法，选择三七皂苷R1 做对照品，建立了制剂中三七的鉴别方法。赵红菊选择了三七中四个有效化学成分分别作为对照品，比较全面的建立了三七药材在该制剂中的薄层色谱方法。该方法值得在复方制剂中推广。贾充沛以芍药苷为对照，展开剂为氯仿-甲醇- 乙酸乙酯，在氨蒸汽饱和下展开，喷以10% 硫酸乙醇溶液于105℃加热显色，作为白芍的鉴别方法;杨新林等进一步对该制剂中白芍的薄层鉴别方法进行了改进。优化了供试液的制备方法，对白芍薄层色谱鉴别用的展开剂和显色方法做了进一步的改进。杨新林等以延胡索乙素为对照，以苯- 丙酮 为展开剂, 以碘蒸气熏至斑点显色, 置紫外光灯 下检视，可以鉴别骨筋丸胶囊中延胡索药材。邢志霞以环己烷- 醋酸乙酯为展开剂，晾干，置紫外光灯下检视。可以用于制剂中蛇床子的薄层色谱鉴别。吴美香等采用薄层色谱法对秦艽进行鉴别，选用GF254薄层板，以秦艽对照药材和龙胆苦苷为对照品，乙酸乙酯- 甲醇- 水 为展开剂。供试品、对照药材和对照品点于同一硅胶板，展开，取出，晾干，置紫外光灯 下检视。结果表明该薄层色谱条件可以鉴别骨筋丸胶囊中秦艽药材。

2.3 骨筋丸胶囊毒性成分检查

该制剂中有峻烈有毒制品制马钱子。马钱子的主要成分马钱子碱和士的宁，占马钱子总生物碱80% 左右，其中，士的宁毒性最强，且治疗量与中毒量非常接近。翟遵兰, 田永庆采用薄层扫描法测定骨筋丸胶囊中毒剧药马钱子中的士的宁的含量, 以乙醚- 甲醇 ，甲苯- 丙酮- 乙醇 - 浓氨水 为展开剂，分两次展开, 双波长发射法线性扫描， 狭缝宽度0.1nm， 线性参数为 Sx = 7、s = ✡254nm、R= 325nm。司晓萍等用反相高效液相色谱法对骨筋丸胶囊中马钱子所含士的宁进行定量检测，以证明骨筋丸胶囊中士的宁含量测定分析方法能适合制剂检测的要求, 确保检验结果的有效性。那微等采用HPLC 法建立骨筋丸系列品种中马钱子碱和士的宁在相同色谱条件下含量测定方法。以乙腈- 0.01 mol /L 庚烷磺酸钠与0. 02 mol /L 磷酸二氢钾等量混合溶液 为流动相;检测波长260 nm;体积流量1.0➳mL/min;柱温25 ℃。结果表明该流动相可以同时测定马钱子碱和士的宁的含量。李珺沬、蒋晔建立毛细管电泳场放大富集技术同时检测骨筋丸胶囊中有效毒性成分士的宁和马钱子碱的方法❅。选择未涂渍弹性石英毛细管为分离通道，20mmol/L 醋酸钠 为运行缓冲溶液;运行电压20 kV;进样电压20 kV，进样时间25 s;在进样之前设定用水冲洗，压力为3.5 kPa，冲洗时间3s;紫外检测波长260 nm。该方法使士的宁和马钱子碱的检测灵敏度分别提高了600❥ 倍和400 倍。本方法简便、快速、富集效率高，为骨筋丸胶囊生产过程中的质量控制及临床药物监测提供了一种新的、可靠的分析手段。

2.4 骨筋丸胶囊有效成分含量测定

骨筋丸胶囊按照中成药君臣佐使的配伍原则，结合中药现代化的检测技术，多数报道采用反相高效液相色谱法测定该制剂中某味药材中所含有效成分的含量，从而评价对该制剂的含量，并为临床用药提供参考。主要含量测定如下：

黄海萍等采用反相高效液相色谱法测定骨筋丸胶囊中有效成分芍药苷含量。以甲醇一水 为流动相，检测波长为230nm，结果表明 ッ可以用来测定本制剂中芍药苷的含量。彭禹等以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液 为流动相，用血竭素高氯酸盐作为对照品。检测波长440nm，结果表明能有效地测定该制剂中血竭的含量。刘倩 等采用岛津LC-10AT HPLC 仪，ODS-C18 色谱柱，流动相为甲醇- 水，检测波长322nm。以蛇床子素对照品，结果表明该法用于测定蛇床子素的含量方法准确简便。吴美香等选龙胆苦苷为对照品; 甲醇- 水 为流动相; 检测波长270 nm;对龙胆苦苷进行含量测定。结果表明该方法可以作为该制剂中秦艽的含量评价方法。另外李楠等选用反相高效液相色谱梯度洗脱法同时测定骨筋丸胶囊中龙胆苦苷和芍药苷的含量方法流动相为甲醇- 水梯度洗脱;流速：1.0mL/min;检测波长为230 nm;柱温30℃。由于处方中白芍和秦艽的处方量较大，可以用此方法控制该制剂中白芍和秦艽的含量。

3 小结

总之，骨筋丸胶囊质量控制的方法还存在一定的不足，主要是鉴别药味不符合国家中成药复方制剂的有关要求，多数报道只有其中两到三味药材进行了比较系统的鉴别。建议将文献中报道的单味药材的薄层色谱鉴别方法均纳入该制剂的质量标准体系。对于该制剂中毒性药材制马钱子只选取马钱子碱和士的宁两种成分进行限量或含量测定，安全性评价需进一步提高。最重要的是该制剂中有效成分含量控制，多数都比较单一。只选取其中某一有效成分作为该制剂含量的评价指标，对于其质量控制而言，不具有整体性和科学性。因此，骨筋丸胶囊安全性和有效性的质量评价还处于相对落后的状态，有待于进一步提高该制剂的质量评价标准。