2008―2012奉化市成人麻疹临床分析与病毒基因特征研究

摘要：目的：应用分子生物学方法检测奉化市2008-2010年成人感染麻疹病毒，分析麻疹病毒基因特性，了解成人麻疹的发病原因，为麻疹监测和防治提供依据。方法：收集100例成人麻疹患者的咽拭子和血清，应用逆转录-聚合酶链反应扩增麻疹野毒株的核蛋白（N）基因碳末端的456个核苷酸并进行核苷酸序列测定，与基因库中按照病毒各基因型参考株比较并分析毒株变异情况。结果：奉化市成人麻疹临床表现典型，分离到的麻疹病毒均为H1基因型，与H1型参考株的核苷酸同源性为97.1%-98.0%，与中国疫苗株沪191的核苷酸/氨基酸差异为8.0-9.0%/9.8-14.5%。

关健词：成人麻疹 流行病学 病毒基因 资料与方法

一、 研究对象

二、 方法

2.1、病毒RNA提取

取出三个样品（麻疹病毒不同分离株，-80℃冻存，取至上海分子病毒实验ง室）和一个标准株作阳性对照。麻疹减毒活疫苗沪191（取至上海疾控中心），采用德国QIAGEN公司的Rneasy Mini Kit，按试剂盒说明书提取麻疹RNA

2.2、引物

2.3、逆转录-聚合酶链反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）

2.4、核苷酸序列测定及分析

扩增后产物送上海Invitrฒogen公司进行序列测定，测序结果的序列拼接、处理分析使用了DNA BSTAR软件，其余参比的代表株序列均来自基因库（GenBank）。

3结果

3.1、入组病例临床资料分析

3.2、基因亲圆形关系树

将所测得的3株麻疹野病毒N基因碳末端的456bp核苷酸序列与Genebank中麻疹病毒各基因型参考株进行比对，明确本研究中分离到的3株麻疹病毒基因型均为H£型，与中国流行的基因型一致。有图3可见，3株麻疹病毒均属H1基因型中的H1a亚型，与其他参考株之间存在较大的差异。

3.3、序列分析及同源性

4讨论

参考文献ค：

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